药物性肝损伤患者血清外泌体 microRNA 筛选及其临床运用研究

1.收集药物性肝损伤（含中草药、抗结核药及其他药物致 DILI 各 5 例）、病毒性肝炎（含乙、丙型各 5 例）、自身免疫性肝病（含 AIH、PBC 各 5 例）、非酒精性脂肪性肝炎（NASH）（5 例）患者和健康人群（5 例）的血清样本；通过基因测序方法鉴别 DILI 患者血清外泌体中特异性表达的 microRNA 谱。 2.在本中心肝病科扩大样本量（每组不低于 20 例）收集 DILI 等患者的血清，提取血清中的外泌体，使用荧光定量 PCR 方法检测外泌体中通过基因测序方法筛选出的统计学差异最显著的不少于 5 种 microRNA 的浓度，分析该 microRNA 谱对 DILI 的诊断意义。 3.设计针对这几种 microRNA 的最佳的引物和荧光探针组合，通过 ROC 拟合曲线判断每种 microRNA 检测的阈值，原则上不少于 3/5 的 microRNA 检测值超过阈值定义为 DILI 阳性；验证该 microRNA 谱对 DILI 患者诊断的敏感性及特异性，评估该 microRNA 谱对 DILI 患者诊断的价值。